BRAF基因是一种重要的原癌基因，位于第7号染色体的长臂上（7q34），编码B-RAF蛋白。BRAF蛋白是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，为RAF激酶家族中的一员。RAF激酶家族（ARAF、BRAF和CRAF）是RAS-RAF-MEK-ERK信号级联（MAPK信号）的核心组成部分，可在整个细胞内传递来自细胞外环境的信号提示，从而指导细胞增殖分化。MAPK信号传导的异常活化是许多恶性肿瘤的标志，最常由RAS和BRAF发生突变所致。
当生长因子与细胞表面的受体结合后，受体的酪氨酸激酶结构域被激活并通过RAS激酶发出信号。RAF蛋白是活化的RAS蛋白的直接效应子，RAF分子的二聚化通过磷酸化和激活MEK进一步传递该信号级联，磷酸化的MEK激活ERK，活化后的ERK从胞质进入细胞核，磷酸化和活化核内的效应分子，最终启动与细胞增殖有关的靶基因转录，促进细胞增殖、分化、迁移和存活。
BRAF基因对于正常细胞的生长至关重要，但不受抑制的BRAF信号传导会促进肿瘤的发生发展。正常细胞中BRAF蛋白传递来自细胞膜的信号，BRAF蛋白通常只在需要传递信号时保持活性状态。当BRAF基因发生致癌突变时，BRAF蛋白处于持续激活状态，干扰了细胞信号传递链的正常功能，引起细胞的异常。
BRAF基因突变临床特征1.突变类型
目前，已有30多种不同的BRAF突变被发现，根据突变信号转导机制和激酶活性可将BRAF突变分为3类，分别是V突变激酶激活单体（Ⅰ类）、激酶激活性二聚体（Ⅱ类）和激酶失活性异源二聚体（Ⅲ类）（图2）。三种突变类型的激酶活性和对靶向抑制剂的反应均存在差异，应选择不同的治疗方案。BRAF基因突变分类
2.突变频率
BRAF基因最常见的突变是V突变，BRAFV突变发生于多种肿瘤中：在黑色素瘤中发生率为40-50%，甲状腺癌中发生率为10-70%（取决于组织学类型），结直肠癌中发生率为10%，非小细胞肺癌中发生率为3-5%。在乳腺癌、胃癌、胆管癌、卵巢癌、胰腺癌和一些罕见病（如朗格汉斯细胞组织细胞增生症和脂质肉芽肿病）中，同样存在BRAF突变。BRAF基因在泛癌症中的改变频率
BRAF基因突变在多种肿瘤中均可检出，存在多癌种共发的广谱致癌性，其中在恶性黑色素瘤（50~60%）、甲状腺癌（30~50%）、结直肠癌（10%）、肺癌（3%）和毛细胞白血病（%）中较为常见。黑色素瘤
在黑色素瘤患者中，BRAF基因突变比例占50~60%左右，其中VE突变常见于年轻患者，VK则多见于老年患者。医院一项分析了例黑色素瘤患者的研究发现，中国黑色素瘤患者发生BRAF突变的频率为25.5%，其中VE的突变率为89.1%，慢性日光损伤型、非慢性日光损伤型、肢端型、黏膜型及原发灶不明的黑色素瘤患者BRAFV突变频率分别为18.2%、57.1%、15.5%、12.5%和27.3%。与野生型黑色素瘤相比，BRAF突变黑色素瘤与更差的临床预后相关，且脑转移和肝转移风险显著高于BRAF野生型患者。
肺癌BRAF基因突变是非小细胞肺癌（NSCLC）中重要的驱动基因，突变频率约为2~4%。NSCLC中BRAF的突变位点主要分布于11及15号外显子，约占BRAF突变的50%。一项研究纳入例发生BRAF突变的NSCLC患者，其中I类人群约占45%（例），II类人群占32%（75例），III类人群占23%（54例）。本研究中BRAF突变多达25种类型，86%患者突变位点集中于以下类型：V（45%），G（22%），G（11%），D（8%）。研究结果提示II/III类NSCLC患者可能较I类患者预后更差。结直肠癌
BRAFVE突变在结直肠癌中的突变频率约为5~12%，是结直肠癌中BRAF经常发生的突变，为结直肠癌预后不良的因素之一。这一突变使BRAF激酶活性比野生型增强~倍，引起MAPK通路自发持续异常激活，从而导致结直肠癌的发生发展以及对EGFR单抗如西妥昔单抗、帕尼单抗的耐药。BRAFVE突变型结直肠癌多见于右半结肠（81%），且MSI-H比例更高（30%），好发于女性（65%），几乎不与KRAS突变同时发生。CSCO指南推荐结直肠癌患者行靶向治疗前，应检测BRAFVE突变和RAS突变状态。Mayoclinic的一项多中心回顾性队列研究显示，结直肠癌患者中，发生BRAFnon-VE突变的频率为2.2%（/），占所有BRAF突变患者的21%（/）。BRAFnon-VE突变多发于左半结肠（63%），常见于男性（54%），多为MSS（94%），且与KRAS突变可以同时存在（26%）。对比BRAFVE突变及BRAF野生型的晚期结直肠癌患者，携带BRAFnon-VE突变患者的中位生存期（OS）显著延长（11.4个月vs.43.0个月vs.60.7个月，P0.），多因素分析结果显示BRAFnon-VE突变是结直肠癌预后更好的独立预测因子。
不同肿瘤中BRAF三类突变的占比
BRAF基因突变检测方法BRAF基因突变已成为多种肿瘤临床诊治必需的检测项目，可以选择实时荧光定量PCR（Q-PCR）和下一代测序(NGS)方法。RT-PCR检测具有灵敏性高、特异性强、简便快速的特点。NGS又称高通量测序，广泛应用于医学领域中肿瘤的预防、检测及治疗，能够检测错义点突变、易位、反转、插入和缺失、拷贝数变异等。NGS可以一个平台一份样本即可得到多个基因检测结果，大大节省了时间和样本。
BRAF基因标准品现货与基因突变标准品细胞株定制
BRAF基因标准品现货：
BRAF基因突变位点（临床意义）
NGS肿瘤多基因检测试剂盒适用于检测患者肿瘤组织中与靶向治疗密切相关的多个基因的突变状态，依次筛选出适合接受靶向药物治疗的患者，突破传统检测一份标本只能做一次检测的局限，减轻患者经济负担，实现精细化精准医疗。海星生物成熟的基因编辑系统：CRISPR/Cas9基因定点编辑技术、VIRUS-Free?基因稳转技术、ClonePlus?细胞单克隆三大核心技术，可以轻松实现：多基因、高频率、稳定传代的突变标准品细胞株构建，有效解决多基因多细胞系混合突变频率不确定的难题。
基因突变(Mutation)标准品细胞株定制
优势：可以指定任何突变区域、任何变异类型（SNV、Indel）；可以实现：多基因、高频率、稳定传代的肿瘤突变标准品细胞株构建，有效解决多基因多细胞系混合突变频率不确定的难题。
周期：7~12~18周
变异频率：%；或50%(注：不同技术路线，变异频率略有差异)
交付成果：稳定传代细胞株；同时可提供背景细胞株（野生型细胞株）；
交付形式：细胞株、gDNA、ctDNA、FFPE蜡块
验证方法：PCR检测、Sanger测序验证
可选：qPCR确认拷贝数或数字PCR确认拷贝数或其它检测方法
适用：NGS、qPCR、数字PCR等平台性能评估
作者：海星生物以上内容由海星生物（